FNV-SARS-CoV-2-S（可感染细胞）-博奥龙Biodragon

1、产品保存液成分

主要成分：Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl、glucose
因为是病毒保存液的溶剂，病毒里面会有微量的血清、DMEM培养基的残留，还可能会有细胞的一些杂蛋白残留，这些都没法完全去除。

2、可否用投射电镜拍到该假病毒形貌，可否提取核酸信息

病毒是颗粒状的，正常是能用投射电镜拍到形貌；病毒里的核酸序列除了S蛋白序列之外，都是假病毒的核酸序列，不是新冠病毒的核酸序列

3、假病毒是可溶的蛋白还是颗粒状的？如果是颗粒状的加入到LB或者MSgg培养基是否会对它有影响？

假病毒是颗粒状的；没有测试其在LB或MSgg培养基中的影响

4、如果假病毒颗粒中包裹有荧光蛋白是不是只有转染到细胞才能检测到荧光？

假病毒里只有荧光蛋白核酸序列，没有荧光蛋白，只有转染到细胞才能检测到荧光，单独的假病毒不能检测到荧光

5、病毒粒径

100-120纳米左右

6、4℃保质期

短时间12小时内影响不大，时间长的话活性会降低甚至无法使用；-80度保存，避免多次冻融。

7、滴度

梯度稀释法，大于1*10的7次方。大家用的是梯度稀释法，是用一样数量的细胞，例如细胞数量都是1E+5，如果加了10ul病毒，细胞全部感染满了，那就是过度感染，如果加了1ul感染了百分之10，那就是1ul的病毒夜感染了1E+4个细胞，那么1ml就可以感染1E+7个细胞，差不多是这样算出来的。

8、荧光素酶的值

不同仪器、试剂盒不同，大概10的5-6次方

9、中和实验，下降多少有效
这个很难定义，50-70%可以认为效果比较好

10、大家可感染细胞的假病毒，用检测新冠的S蛋白试剂，可以检测出来的吧？

理论上是可以的，但是大家没检测过

11、可感染细胞用量

96孔板每孔的可感染细胞假病毒用量2-10ul,假病毒浓度是1-10的7次方，1ul也就是10的4次方

12、待感染细胞的每孔用量

1*10的4次方，培养24小时（约增长1.5倍左右，也就是2*10的4次方）
综合：待感染细胞和假病毒病毒的数量比推荐是：1:5~1:1

13、大家的可感染细胞的假病毒，可以侵染Vero细胞么？

侵染Vero细胞没做过测试，目前大家做过测试过的只有经过ACE2过表达的293系列细胞，还有野生型的huh7细胞，但是huh7 的效率不高，还有一个bhk21细胞

14、假毒是HIV骨架吗

是的

15、说明书中的mock 是什么

mock是空细胞

16、假病毒里的荧光素酶用什么试剂盒激活？

大家用promega 的

17、可感染细胞的假病毒是怎么构建的

是HIV骨架改造的，加了S蛋白包膜，载体质粒里有GFP和荧光素酶。常规慢病毒三个质粒=慢病毒的包装质粒+VSVG包膜外壳+载体质粒（含有目标基因）；可感染细胞的假病毒三个质粒=慢病毒的包装质粒+新冠S蛋白包膜外壳+载体质粒（含有GFP和荧光素酶）

18、产品颜色

个别产品是偏粉红色，不影响使用

19、荧光是单荧光还是双荧光

目前都是单荧光，萤火虫的

20、PCR定量引物

ZsGreen-QPCR-F：ACGAGTCCAAGTTCTACGGC
ZsGreen-QPCR-R：CGGGGATGATCTTCTCGCAG

21、有感染活性的假病毒内的S基因的3.8k基因序列或引物序列是什么

只提供相关参考文献，序列不对外公布

22、可感染细胞的假病毒目前情况

可感染细胞的假病毒目前主要由HIV骨架和VSV骨架两种，两种病毒都可以用于细胞实验和动物实验，VSV骨架假病毒做动物实验效率会略好一些。大家的假病毒是HIV骨架的。
HIV骨架假病毒三个质粒=慢病毒(HIV)的包装质粒+新冠S蛋白包膜外壳+载体质粒（含有GFp和荧光素酶）
VSV骨架假病毒三个质粒=水泡性口炎病毒载体（VSV）的包装质粒+新冠S蛋白包膜外壳+载体质粒（含有GFp或荧光素酶）
假病毒的动物实验：先用腺病毒让动物的部分组织或器官有ace2细胞的过表达，在用可感染细胞的假病毒进行侵染实验

类别	产品情况	货号	名称
原始株	有	BDAA0026	FNV-SARS-CoV-2-S（可感染细胞）
Alpha	无
Beta	只有三个点突变株（E484K、K417N、N501）	BDAA0084	FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(E484K、K417N、N501Y)
Gamma	只有三个点突变株（E484K、K417N、N501）	BDAA0084	FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(E484K、K417N、N501Y)
Delta	有	BDAA0115	FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(B.1.617.2)(delta)
Lambda	无
Omicron	有	BDAA0117	FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(B.1.1.529)(Omicron)

FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(S982A)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(BA.4)(Omicron)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(B.1.1.529)(Omicron)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(B.1.617.2)(delta)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(L452R-E484Q-P681R)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(E484Q、L452R)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(Q1071H)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(P681R)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(E484Q)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(E154K)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(G142D)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(T95I)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(L452R)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(Y453F)2022-11-24
FNV-SARS-CoV-2-S(可感染细胞)(S477N)2022-11-24

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Catalog_no	BDAA0026
Product_name	FNV-SARS-CoV-2-S（可感染细胞）
Size	1ml(200ul/支)
Category	冠状病毒产品
Price	12000
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